論文分享｜基于MGC系列揭示環(huán)境鎂離子對副溶血性弧菌毒力與生物膜形成的全局調(diào)控

發(fā)布時間：2025-01-17　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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研究摘要

　　副溶血性弧菌是一種廣泛存在于海洋生態(tài)系統(tǒng)中的細菌，常引起人類急性胃腸炎。鎂離子作為海水中第二豐富的金屬陽離子，對副溶血性弧菌的生長和基因表達至關(guān)重要。盡管如此，關(guān)于鎂離子如何具體影響副溶血性弧菌生理特性的詳細機制仍不明確。通過RNA測序分析，研究團隊發(fā)現(xiàn)共有1494個基因受到鎂離子的顯著調(diào)控。其中與側(cè)鞭毛、胞外多糖、Ⅲ型分泌系統(tǒng)2、VI型分泌系統(tǒng)(T6SS)1、T6SS2和耐熱直接溶血素相關(guān)的基因大部分被下調(diào)。此外，18個可能參與c-di-GMP代謝的基因和八十多個編碼假定調(diào)節(jié)因子的基因也存在顯著差異表達。這些結(jié)果表明，副溶血性弧菌對鎂離子脅迫的適應過程可能受到復雜調(diào)控網(wǎng)絡的嚴格調(diào)控。鎂離子促進了副溶血弧菌的增殖速度、游泳運動能力和細胞黏附能力，但抑制了其群集運動能力、生物膜形成能力和c-di-GMP生成能力，而對莢膜多糖生成能力和對HeLa細胞的細胞毒性沒有顯著影響。這些發(fā)現(xiàn)揭示了鎂離子對副溶血弧菌生理特性和基因表達的綜合影響。

MGC系列微生物生長曲線分析儀的應用

　　為了評估不同濃度鎂離子對副溶血性弧菌生長的影響，研究團隊使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀。實驗中，副溶血性弧菌RIMD2210633菌株在含有不同濃度MgCl2(0、3.5、35和55 mM)的心臟浸出液(HI)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。將培養(yǎng)的OD600達到1.4的副溶血性弧菌以1：1000的稀釋倍數(shù)接種到含有不同MgCl2濃度的HI培養(yǎng)基中，然后分裝到96孔細胞培養(yǎng)板，每孔含有200μL菌懸液，每個濃度設置12個生物學重復。MGC-200每20分鐘自動檢測一次OD600值，以監(jiān)測細菌的生長情況。

實驗數(shù)據(jù)